Como realizar estimativas de plaquetas

A capacidade de estimar as contagens de plaquetas é uma habilidade essencial quando se trabalha em laboratório. As plaquetas são fragmentos do citoplasma que ajudam o sangue a coagular. A contagem de plaquetas é usada para determinar trombocitopenia (contagem baixa de plaquetas) e trombocitose (contagem alta de plaquetas). Segundo o Instituto Nacional de Saúde, as contagens normais de plaquetas são entre 150.000 a 400.000 plaquetas por microlitro de sangue. A trombocitopenia está associada à anemia aplásica, deficiência de folato, deficiência de vitamina B12 e leucemias agudas. A trombocitose está associada à anemia hemolítica e à policitemia vera (produção excessiva de glóbulos vermelhos).

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Dilua a amostra de sangue em uma proporção de 1: 100 de sangue para diluente (oxalato de amônio). Remova a pipeta de sua blindagem assepticamente, empurrando a ponta da proteção da pipeta através do diafragma no gargalo do reservatório. Toque no lábio da pipeta até o sangue e permita que o orifício da pipeta se encha de sangue. Cubra a abertura da pipeta com o dedo indicador e coloque a pipeta no gargalo do reservatório. Libere a pressão no reservatório e remova o dedo indicador da pipeta. Deixe repousar por 10 minutos para permitir que os glóbulos vermelhos hemolisem.

Encha o hemocitômetro, que é um lado de vidro com uma câmara de contagem contendo linhas medidas de profundidade conhecida, com sangue, apertando os lados do reservatório; em seguida, coloque o hemocitômetro em uma placa de Petri coberta e deixe descansar por 10 minutos. Coloque o hemocitômetro no palco (a plataforma plana usada para montar as lâminas) de um microscópio de luz ou de fase brilhante e coloque a área regrada do hemocitômetro em foco usando a objetiva de baixa potência.

Mude para a objetiva 43X para aumentar sua ampliação e para focar o grande quadrado central do hemocitômetro. Conte as plaquetas em todos os 25 quadrados dentro do quadrado grande do hemocitômetro, contando da esquerda para a direita na primeira linha, depois da esquerda para a direita na segunda linha até que todas as linhas estejam completas.

Multiplique o número de células contadas por 1.000 para chegar à contagem total de plaquetas; por exemplo, se o número de células contadas for = 250, então 250 x 1.000 = 250.000 plaquetas por microlitro.